技术文章

Caspase活性检测相关问题解答点击次数:2208 发布时间:2012-02-01

                                Caspase活性检测相关问题解答

1:Caspase活性测试是如何使用的?www.runwelltac.com

答:Caspase活性测试为在细胞裂解液中检测蛋白酶活性提供了简捷方便的手段。当对专一Caspase的多肽底物被裂解时,释放出的指示分子可用普通读光仪或荧光读板仪来做定量测定。将从细胞凋亡样本得到的信号同未经诱导的对照样本进行比较,可以确定Caspase活性增加的倍数,而Caspase酶活性是同检测到的信号直接成正比。

 

2:Caspase活性测试是否可用于定量检测?

答:R&D Systems的Caspase活性测定试剂盒可作为半定量测试。检测结果用于测量在细胞凋亡细胞中与未经诱导细胞中的Caspase活性倍数的增加。实验时,采用本底对照(无细胞裂解液或无底物的反应)。如果本底对照也有一定的读数,这一读数应当在记算倍数增加之前从试验数据中差减。

 www.biomart.cn/runwell/index.htm

3:Caspase活性检测同Caspase ELISA试剂盒有何不同?

答:Caspase活性检测用于测定不同Caspase的蛋白酶的活性,表达为比未诱导样本的倍数增加。Caspase ELISA试剂盒用于测定不同Caspase在样本中的含量,以pg /mL定量表达。

4:caspase X 活性测试是对caspase X专一的吗?
答:大多数caspase会裂解所有的底物,它们根据Michaelis-Menton动力学趋于选择某一底物而非另一底物,但没有任何底物是对某一Caspase专一的。比如,Caspase 3和Caspase 7都可裂解DEVD底物;Caspase 9、4、5 都可裂解LEHD。R&D Systems为每一Caspase选择了它所适宜的底物。如果反应进行的太久,一些Caspase会激活另一些Caspase。

 www.biomart.cn/runwell/index.htm

5:Caspase活性检测试剂盒中的细胞裂解液是否同其它试剂盒中的一样?

答:所有的Caspase活性检测试剂盒中的细胞裂解液都是一样的。所以,可用它裂解细胞,和用于多种Caspase活性的测试。 

6:R&D Systems的Caspase抑制剂是否可逆?

答:所有R&D Systems的Caspase抑制剂在N端有苯甲氧碳基(Z-)和FMK功能组,它们可穿孔细胞,是不可逆转的。

 www.runwelltac.com

7:R&D Systems是否为Caspase活性检测提供阳性对照?

答:R&D Systems提供多种重组Caspase酶,它们是理想的阳性对照。如果试验者自己想建立一阳性对照,有许多可以产生细胞凋亡的阳性对照的方法都已发表。如果将细胞同2 mM星形孢菌素(Staurosporin)温育2小时,可诱导绝大多数细胞类型进入细胞凋亡。R&D Systems有文献资料列举了对Caspase如何产生阳性对照,可向我们的技术服务索取。
电话:
13788993509
13788995069
021-64133189
传真:
021-64129208
陈小姐点击这里给我发消息
徐小姐点击这里给我发消息
朱小姐点击这里给我发消息
 
安全联盟站长平台

化工仪器网

推荐收藏该企业网站