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Elisa试剂盒实验时吸光值偏高的原因分析
点击次数:1769 更新时间:2022-08-25
Elisa试剂盒
在实验时会遇到各种不同的情况,不过导致实验出问题总是有原因的。有时候ELISA试剂盒实验会出现吸光值变高的情况,这就让很多人不解了。下面为大家具体介绍一下为什么elisa试剂盒实验时吸光值会偏高。
一、室温太高(大于25℃)。
解决办法:若无法降低室内温度,请适当缩短步骤4的温育时间。
二、底物溶液受到污染。
解决办法:若发现底物溶液已呈现淡蓝色,请不要再使用。
三、原因:反应时间超过太久。
解决办法:请控制反应时间。
四、原因:酶标记物污染了盒内其它试剂。
解决办法:使用过的吸头应立即丢弃,可避免试剂间相互污染,凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。
ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
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