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蛋白酶K可以消化各种蛋白质
点击次数:2910 更新时间:2018-04-25
蛋白酶K
是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,可消化各种蛋白质。可以在DNA、RNA抽提中内源性核酸酶的去除,ChIP实验蛋白-核酸复合物解交联后蛋白质的降解,原位杂交前组织样本的制备。可用于糖蛋白修饰和蛋白结构分析等实验中。蛋白酶保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
酶活性:>30 U/mg(每分钟血红蛋白释放1 μmol Folin-阳性酪氨酸所需量,pH7.5,37℃);
酶纯度:>99.5%(经Native-PAGE及laser scan分析);
污染物分析:经琼脂糖凝胶电泳检测,无DNA及RNA污染;
稀释缓冲液:ddH2O
分子量:29.730 KD
pH范围:在较广的pH范围内(pH 4~12.5)均有活性,*pH范围为pH 7.5~8.0。
蛋白酶K的反应温度:37~65℃,推荐反应温度选择50~55℃。温度超过65℃或TCA、AEBSF、PMSF或DFP存在情况下会抑制蛋白酶 K的活性。
工作浓度:常用工作浓度为0.05~1 mg/ml,根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。
蛋白酶K的储存条件:保存于-20℃,保存妥当时,酶效力可保存3年。
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