为了更好地使用
凋亡试剂盒,在使用
凋亡试剂盒前需要了解其工作原理,下面来说明下其工作原理:
在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA被切割,出现单链或双链缺口,并产生与DNA断点数目相同的3’-OH末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(TerminaldeoxynucleotidylTransferase)可以将地高辛标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至3’-OH末端,DIG-dUTP结合在DNA断点部位,可以通过生物标记的抗地高辛抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后,再结合链酶亲和素-过氧化物酶(SABC),然后加入显色底物DAB予以显示。凋亡的细包核呈黄色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。
凋亡试剂盒的注意事项:
1.试剂盒严格-20℃存放。
2.初用时如试管底部无可见的试剂,在离心机离心5分钟,使试剂沉至管底。
3.检测过程中切勿使样品干涸。