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SIGMA试剂理论共享

更新时间:2016-11-15      浏览次数:1470
  SIGMA试剂灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990.特异性:不与其它细胞因子反应。重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
   SIGMA试剂结果判断与分析,仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值.以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的AGEs标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的AGEs含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。检测值范围:0-800ng/ml.敏感度: 1.0 ng/ml.
   SIGMA试剂根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照.核心技术,如实陈述.