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关于血清的一些问题点击次数:835 发布时间:2015-08-14

关于血清的一些问题

血清是细胞培养中zui重要的元素之一。因此,我们特别整理了一些实验室里常会遇到的问题,供大家参考:
   1 存放血清的方法?
   我们建议血清应保存在-20℃以下。然而,若存放于4℃时,请勿超过半个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。


   2 如何解冻血清才不会使产品质量受损?
   我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。


   3 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
   血清中沉淀物的出现有许多种原因,但zui普遍地原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤素蛋白(形成凝血地蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
   若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议你以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。


   4.为什么要热灭活血清?
   加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。


   5.有必要做热灭活吗?
   实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的 。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的活性,而造成细胞生长速度的降低。而经过热处理的 血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点",常常会让研究者误以为是微生物的分裂扩增。
   因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此以来,不但节省你宝贵的时间,更确保血清的质量。


   6.如何避免沉淀物的生产?
   我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:
   ⑴.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
   ⑵.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀使温度及成分均一,减少沉淀的发生
   ⑶.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
   ⑷.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
   ⑸.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多

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