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如何搭配流式抗体荧光标记点击次数:666 发布时间:2014-10-23

     流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多.
    A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体
    流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的,所以首先需要注意两点:
    流式细胞仪有哪些激光。
    不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的.
    B、搭配荧光素原则
    搭配流式荧光素有2个原则:每个通道只能选择1种荧光素;各个通道之间的荧光素可以随意搭配,但需注意的是,APC和PE-Cy5一起使用的话,上流式以后,容易导致补偿过度。
    C、如果检测的指标数目超过了流式细胞仪的通道,怎么办? 
    如果需要做5个指标,而流式细胞仪只能做4个通道,首先将指标归成2类,再将样本分成2份,分别检测。比如需要同时检测CD3、CD4、CD8、IL-4和IFN-gamma,那么将样本分成两份,第1份加CD3、CD4、CD8和IL-4,而第2份加CD3、CD4、CD8和IFN-gamma。
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