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蛋白酶K有哪些常见功效及作用?点击次数:156 发布时间:2022-04-15

  蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会提高杂交信号。但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落细胞核的消失,从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
 
  蛋白酶K的用途及应用:
 
  1.蛋白酶K可用于质粒或基因组DNA、RNA的分离,是DNA提取的重要试剂;
 
  2.亦可裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以灭活病毒,让病毒的蛋白变性,失去活性而“死掉”,不再有传染性,提高运输和检测阶段的安全性;
 
  3.同时蛋白酶K也能够应用到皮革工业、肉类嫩化、灭活生活以及工业用水中的细菌,优点是消毒剂本身无害,而且不产生有害消毒产物,所以这是一种高效环保的方法。
 
  蛋白酶K的存放方法:
 
  保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
 
  使用方法:孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
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