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Elisa试剂盒如何正确洗涤?点击次数:353 发布时间:2021-03-27

  Elisa试剂盒为双抗体夹心法检测抗原RBD蛋白,酶标板采用高亲和力抗RBD蛋白抗体作为包被物,检测时酶标板孔加入待检样品或标准品(哺乳动物重组表达RBD蛋白),再加入生物素化抗RBD蛋白抗体,反应后加入链霉亲和素HRP,较后加入单组份TMB底物液。 如果待检样品中含有RBD蛋白,TMB底物液在HRP催化下显色,加入终止液终止显色后,在酶标仪OD450/OD630读取吸光值,吸光值大小与待检测样品中RBD蛋白浓度呈正相关,根据标准品浓度/吸光值绘制的标准曲线,可计算出待检样品中RBD蛋白含量。
 
  Elisa试剂盒的样品收集:
 
  1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
 
  2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
 
  3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。较后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
 
  4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
 
  5.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
 
  6.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
 
  7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。
 
  8.如果您的样品中检测物浓度高于标准品较高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验,以确定稀释倍数)。
 
  Elisa试剂盒的洗涤方法:
 
  1.自动洗板机:每孔加入洗涤液350μL,注入与吸出间隔60秒。
 
  2.手工洗板:甩尽孔内液体,在洁净的吸水纸上拍干,每孔加洗涤液350μL,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。
电话:
13788993509
13788995069
021-64133189
传真:
021-64129208
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