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流式抗体的知识要点,一看便知!点击次数:267 发布时间:2020-04-27

      流式抗体能够在短时间内检测分析或分选大量细胞,在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学等领域中的应用越来越广泛。其纯度、批次稳定性、特异性,以及流式结果的可重复性备受重视。
  流式抗体的基本结构:
  一个抗体分子上的两个抗原结合部位是相同的,位于两臂末端称抗原结合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部称结晶片段(crystalline fragment,Fc),糖结合在FC 上。Fab是抗原结合片段,直接结合抗原。直接效应。Fc是结晶片段,间接效应端。
  抗体与细胞的结合过程中一般会出现以下情况:
  在抗体孵育过程中,只有抗体的Fab端与目标抗原结合(特异性结合)时,这样的流式图才能反应出细胞抗原表达的真实情况。
  但是,在分子间各种作用力的推动下,抗体FC端也经常与细胞表面的FC受体结合,即我们常说的非特异性结合,此时流式结果就往往不能反映真正的抗原表达情况。
  那么,我们在实验中如何避免这种非特异性情况的出现呢?
  FC受体封闭:
  加入FC受体封闭剂,对细胞膜表面的FC受体提前进行人工封闭干预;或做CD16/CD32抗体封闭实验;
  同型对照(Isotype)抗体;
  重组基因工程改造抗体(REAfinity? Recombinant Antibodies)。
电话:
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