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酶的提取和分离纯化点击次数:1310 发布时间:2011-03-28

                                                        酶的提取和分离纯化

(一)细胞破碎处理www.runwelltac.com

       许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜,使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变。酶学破碎法是指选用合适的酶,使细胞壁遭到破坏,进而在低渗溶液中将原生质体破碎。
 
(二)提取
        的提取是指在一定条件下,用适当的溶剂处理细胞破碎后的含酶原料,使酶充分地溶解到提取液中的过程。酶的提取方法有过柱法、盐溶液提取法、碱溶液提取法和有机溶剂提取法等。为了提高酶的提取率和防止酶提取后变性失活,提取过程中必须注意保持适宜的温度和pH值,并且添加适量的保护剂。
 
(三)分离
       提取液中含有多种酶,要想从提取液中分离纯化出某一种酶,必须根据这种酶的特性,选择合适的分离纯化方法。酶分离纯化的方法很多,可利用酶相对分子质量的大小进行分离纯化,如通过透析的方法分离酶等。
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