在细胞培养的实验中,难免会遇到这样那样的问题,比如细胞不贴壁、HP值变化迅速、细胞凋亡、等等。
细胞生长缓慢
1.培养基或血清改变:比较不同培养基配方中葡萄糖、氨基酸及其他成分有无差异;通过生长实验比较新老批次血清有无差异;增大细胞初始接种密度;使细胞逐步适应新的培养基。
2.必需生长促进成分(如L-谷氨酰胺或生长因子)耗竭、缺乏或分解:去除原培养基,加入新鲜培养基;向培养基中添加生长促进成分(如L-谷氨酰胺)。
3.轻度细菌或真菌污染:在不添加抗生素的条件下进行培养,如细胞被污染,灭菌处理后丢弃。
4.时间存储不当:血清应于-5℃至-20℃下储存;培养基应于2℃~8℃下避光储存;尽量减少血清和培养基见光时间。
5.细胞初始接种密度低:增大活细胞接种密度。
6.细胞衰老、老化:将老化细胞丢弃,取用代数较少的细胞。
7.支原体污染:隔离细胞,检测是否感染支原体;清洗通风厨和培养箱,如细胞被污染,灭菌处理后丢弃。