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流式抗体搭配荧光素原则点击次数:969 发布时间:2010-12-21

流式抗体搭配荧光素原则


       流式抗体搭配流式荧光素主要有2个原则:*,每个通道只能选择1种荧光素;第二,各个通道之间的荧光素可以随意搭配,因此需要注意:
       1流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。以Calibur为例说明,CaliburFL1通道选择了Alexa Fluro488就不能选FITC ,或者选择了FITC就不能选择AlexaFluro488CaliburFL3通道尽管能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五个荧光素,但是我们搭配的时候只能选择其中1个。
       2、各个通道之间的荧光素可以随意搭配:如果客户的流式细胞仪能做4个通道,在第1个原则之下,那么每个通道随便选出1个荧光素就可以组合成4个颜色。以2跟激光的Calibur为例,Calibur各个荧光素之间可以搭配出16种组合。比如常用的搭配是F I T C( F L 1 )P EF L 2)+PerCPFL3+APC(FL4), 这个搭配组合可以更改成Alex Fluro(FL1)PEFL2)+PerCPFL3+APC(FL4), 或者FITC(FL1)PEFL2)+PerCPFL3+Alex Fluro(FL4),或者FITC(FL1)PEFL2)+PE-Cy5FL3+APC(FL4)等等。总之,在第1原则之下,我们可以随意搭配和组合各个荧光素。但是需要注意的是,APCPE-Cy5一起使用的话,上流式以后,容易导致补偿过度。

所以说,以上也是流式抗体荧光素搭配的注意事项!

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