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如何去除胎牛血清中的黑点?
点击次数:1173 更新时间:2016-09-28
胎牛血清将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
胎牛血清细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:
1.细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
2.血清质量不好,反复冻融的结果;
3.配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;
4.配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
5.培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
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